實驗

二(er)(er)甲(jia)(jia)基十(shi)二(er)(er)烷基氨基丙(bing)烷磺(huang)酸鹽(yan)（DPS；≥來自Fluka、癸酰-N-甲(jia)(jia)基葡糖(tang)苷（Mega-10；98%純）、α-CD和RB的(de)99%）(～收到時使用(yong)來自Sigma的(de)95%純度）。所有(you)溶(rong)液均在從(cong)電阻率為18.2 MΩcm的(de)Direct-Q微孔系統中獲得的(de)Milli-Q水(shui)中制備。

方法

使用(yong)芬蘭Kibron公司的EZ-PI界面張力計測(ce)量界面張力[23]。該(gai)儀器配有傳(chuan)感(gan)器探頭(tou)和反(fan)應杯(bei)支架。將4 ml表面活性劑溶液引(yin)入反(fan)應杯(bei)并放置在(zai)反(fan)應杯(bei)支架上。所有測(ce)量均在(zai)24.0±1°C下(xia)進行。

使用熒光(guang)(guang)偏(pian)振儀(yi)系統(tong)（Beacon 2000）在25.0±0.2°C下進行(xing)所有(you)熒光(guang)(guang)各向(xiang)異性(xing)(xing)測量(liang)。RB用作熒光(guang)(guang)探針，其(qi)濃(nong)度保持在0.1μM。分別使用570和630 nm的激(ji)發和發射(she)波(bo)長測量(liang)熒光(guang)(guang)各向(xiang)異性(xing)(xing)。當發射(she)偏(pian)振器平行(xing)或(huo)垂直于偏(pian)振激(ji)發方(fang)向(xiang)時，每(mei)個熒光(guang)(guang)強(qiang)度稱為I||或(huo)I┴,分別地各向(xiang)異性(xing)(xing)是強(qiang)度差(cha)（I||-I）的比率┴)總強(qiang)度（I||+2I）┴)如(ru)等(deng)式1[24，25]所示：

給出的各向(xiang)異性值是十(shi)個讀(du)數的平均值。

核磁共振

核磁(ci)共振譜記(ji)錄在(zai)BRUKER DRX600核磁(ci)共振光譜儀(yi)上，該光譜儀(yi)在(zai)14.1 T的(de)(de)場強下工作。分(fen)別(bie)在(zai)1 mM的(de)(de)Mega-10和(he)DPS溶液中，用小份的(de)(de)α-環(huan)糊精(jing)滴(di)定，最(zui)終濃度分(fen)別(bie)為64.7和(he)68.1 mM。1D?在(zai)每個(ge)濃度下記(ji)錄1H-NMR譜。對于這兩種表面活性劑，使用CH3基團(tuan)的(de)(de)化(hua)學(xue)位移來跟蹤絡合物的(de)(de)形成。

在任何給定(ding)的(de)α-環(huan)糊精(jing)濃度下，結(jie)合(he)表(biao)面活性劑分子的(de)分數都可以通過(guo)其信號(hao)的(de)化(hua)(hua)學位(wei)移(yi)(yi)來確(que)定(ding)。客體分子在束(shu)縛(fu)態(tai)（δ束(shu)縛(fu)態(tai)）和自(zi)由態(tai)（δ自(zi)由態(tai)）有不同的(de)化(hua)(hua)學位(wei)移(yi)(yi)。在自(zi)由形式和束(shu)縛(fu)形式之(zhi)(zhi)間(jian)的(de)平(ping)衡以及這兩種狀(zhuang)態(tai)之(zhi)(zhi)間(jian)的(de)交換率(lv)（比共(gong)振(zhen)頻率(lv)差快(kuai)）的(de)情況(kuang)下，將(jiang)僅觀(guan)(guan)察到(dao)一個具有觀(guan)(guan)測到(dao)的(de)化(hua)(hua)學位(wei)移(yi)(yi)（δobs）的(de)信號(hao)，即δ束(shu)縛(fu)和δ自(zi)由之(zhi)(zhi)間(jian)的(de)加權平(ping)均數。對(dui)于以下內容，我(wo)們定(ding)義了觀(guan)(guan)察到(dao)的(de)化(hua)(hua)學位(wei)移(yi)(yi)變化(hua)(hua)(?δobs）和結(jie)合(he)時化(hua)(hua)學位(wei)移(yi)(yi)的(de)變化(hua)(hua)(?δ界）：

兩者之(zhi)間的(de)(de)比率(lv)?δobs與?因此，δ束縛態相當于束縛客(ke)體(ti)分子的(de)(de)摩爾分數：

[CDS]可(ke)以(yi)從關聯常數(shu)的定義(yi)中分離出來：

式中，[CD]f是自由主體(ti)分子(zi)的濃度(du)，即(ji)(ji)CD，[S]f是自由客體(ti)分子(zi)的濃度(du)，即(ji)(ji)表(biao)面活性劑，[CD]是絡合物的濃度(du)，即(ji)(ji)環糊精-表(biao)面活性劑絡合物。

Ka通過將等(deng)式6與(yu)[CDS]與(yu)[CD]0的實驗數(shu)據擬(ni)合而(er)確定(ding)。在式6中，CD0和S0分別為總環(huan)糊(hu)精和總表面活性劑(ji)濃(nong)度。

從含有(you)100 mMα-CD和1 mM洗(xi)滌劑的(de)溶液中確(que)定δ結合的(de)初始(shi)估計值(zhi)。這(zhe)是合理的(de)，因為我們滴(di)定的(de)化(hua)學位移高達(da)約70 mMα-CD，已接(jie)近最終值(zhi)。δ界(jie)的(de)初始(shi)值(zhi)用(yong)于擬(ni)合Ka的(de)初始(shi)值(zhi)。Ka值(zhi)隨后用(yong)于確(que)定δ界(jie)的(de)理論值(zhi)。重復該(gai)過(guo)程，直到Ka和δ界(jie)的(de)值(zhi)收斂。

在含有50 mMα-CD和50 mM表面活性(xing)劑(ji)的樣品上，獲得了混合時(shi)間為250 ms的二維旋轉(zhuan)框架懸置效應(ying)光(guang)譜（2D-ROESY）。以（180°×180°）的順序實現旋轉(zhuan)鎖定?×）場強為2.5 kHz的脈沖(chong)。借(jie)助2QF-COSY光(guang)譜對CD和表面活性(xing)劑(ji)共振進行分配。