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蛋白質外聚物中多糖的比例——結果與討論

來源:上(shang)海謂載 瀏覽 1446 次 發(fa)布時間:2021-10-12


三、結果與討論


3.1. 表面張(zhang)力與蛋白質的(de)關系(xi):多(duo)糖比 在(zai)中(zhong)觀實驗中(zhong)


使(shi)用(yong) EPS 膠體分數,SFT 張力測(ce)量來自(zi) 三個中(zhong)宇宙(zhou)(zhou)實驗比較(jiao)海水(shui)(shui)和(he)兩(liang)個沿海 水(shui)(shui)域(yu)如圖 1 所示(shi)。 表 1 總結(jie)了(le)三個中(zhong)宇宙(zhou)(zhou)實驗的(de)(de)參數。我們發現海洋(yang)(yang)雪和(he) 在 Control、WAF 和(he) DCEWAF 中(zhong)觀察(cha)到海洋(yang)(yang)油雪 (MS/MOS) 沉積,而 CEWAF 有(you)混濁的(de)(de)懸浮液, 最(zui)后一(yi)天只(zhi)有(you)稀疏的(de)(de)沉積物(Xu et al. 2018a)。 為(wei)了(le) 開(kai)闊的(de)(de)海洋(yang)(yang)條件(第(di)(di) 4 天,用(yong)營養(yang)物質修(xiu)正)和(he)第(di)(di) 2 天 沿海水(shui)(shui)域(yu)(第(di)(di) 3 天,用(yong)微(wei)生物濃縮(suo)物修(xiu)正;第(di)(di) 4 天, 用(yong)營養(yang)素修(xiu)正)在圖 1 中(zhong),SFT 的(de)(de)趨勢(shi)與 蛋白質:多糖比例的(de)(de)函數,均取(qu)自(zi) 來自(zi)水(shui)(shui)柱(zhu)的(de)(de) EPS 膠體。 EPS膠體組分用(yong)于 不同的(de)(de)中(zhong)觀實驗集中(zhong)在 8.3 倍 用(yong)微(wei)生物濃縮(suo)物修(xiu)正沿海水(shui)(shui)域(yu)的(de)(de)中(zhong)宇宙(zhou)(zhou); 25 在廣闊的(de)(de)海洋(yang)(yang)中(zhong)的(de)(de)中(zhong)宇宙(zhou)(zhou)時(shi)代; 而不是集中(zhong)在 沿海水(shui)(shui)域(yu)的(de)(de)中(zhong)觀生態系統被養(yang)分修(xiu)正。


CEWAF 在水柱中保(bao)持含有油(you)滴的膠體材料(liao)的乳(ru)(ru)液。 雖然 CEWAF 治療 導致(zhi)更穩定的乳(ru)(ru)液,它們的酶促作用(Kamalanathan 等(deng)(deng)(deng)。 2018), MOS沉降(jiang)效率, 通過碳評估 質量平衡和 14C 分(fen)析(Xu 等(deng)(deng)(deng)人(ren),2018a)、多(duo)樣性和 豐富的浮游植物(wu)(Bretherton 等(deng)(deng)(deng)人(ren),2018 年); 在正烷(wan)烴(jing)和生物(wu)標志物(wu)比較中觀察到的生物(wu)降(jiang)解程度(Wade 等(deng)(deng)(deng)人(ren), 2017); 在這些實驗的持續時(shi)間內,分(fen)子組成的氧化(hua)變化(hua)(Hatcher 等(deng)(deng)(deng)人(ren),2018 年)似乎都大大減少(shao)了。 



圖 1. SFT 與(yu)蛋白(bai)質(zhi)(zhi)多糖(tang)比的(de)(de)比較 (蛋白(bai)質(zhi)(zhi):多糖(tang))在開闊的(de)(de)海洋與(yu)兩個(ge)沿海環(huan)境中(zhong)。 這(zhe) 蛋白(bai)質(zhi)(zhi):多糖(tang)的(de)(de)所有環(huan)境的(de)(de)處理都顯示出類(lei)似的(de)(de)趨勢 其(qi)中(zhong) CEWAF > DCEWAF > WAF ≥ Control 并且 SFT 的(de)(de)趨勢是 與(yu)此(ci)模(mo)式相反。 每個(ge)數據點是一式三(san)份(fen)的(de)(de)平均值(3 個(ge)獨立(li)的(de)(de) 每次治療的(de)(de)中(zhong)胚層和 5 次 SFT 測量值 < 0.30 mN/m CEWAF 的(de)(de)標準(zhun)偏差(cha),其(qi)他處理的(de)(de)標準(zhun)偏差(cha) < 0.05 mN/m)。


EPS 膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)(ti)溶液的(de)(de)(de)(de) SFT 與(yu) 蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi)(更疏水)到多(duo)(duo)糖(tang)(tang)(更親(qin)水) 集中度(du),可以(yi)作為整體(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)相對度(du)量(liang) 膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)(ti)部分的(de)(de)(de)(de)疏水性。 此外,圖1中的(de)(de)(de)(de)數據 意味著石油(you)和(he)/或(huo) Corexit 的(de)(de)(de)(de)存在導(dao)致增強 EPS 膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi):多(duo)(duo)糖(tang)(tang)比(bi)(bi)率,但降低了 膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)(ti)部分的(de)(de)(de)(de) SFT。 CEWAF 中蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi)含(han)量(liang)較高(gao)(gao)(gao)(gao) 處(chu)理(li)(li)對應的(de)(de)(de)(de)細菌計數高(gao)(gao)(gao)(gao)于(yu)其(qi)他處(chu)理(li)(li) 治療(liao)(Kamalanathan 等(deng)人(ren),2018 年;Doyle 等(deng)人(ren),2018 年)。 DCEWAF 還具有更高(gao)(gao)(gao)(gao)的(de)(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi)含(han)量(liang)和(he)更高(gao)(gao)(gao)(gao)的(de)(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi):多(duo)(duo)糖(tang)(tang) 比(bi)(bi) WAF 和(he)對照(zhao)(zhao)處(chu)理(li)(li)。 值得注意的(de)(de)(de)(de)是(shi),當 與(yu)不同(tong)的(de)(de)(de)(de)中宇宙(zhou)(zhou)實驗相比(bi)(bi),開闊的(de)(de)(de)(de)海(hai)(hai)洋(yang)中宇宙(zhou)(zhou)的(de)(de)(de)(de)油(you)濃(nong)(nong)度(du)高(gao)(gao)(gao)(gao)兩倍(bei),相對 DCEWAF 處(chu)理(li)(li)中的(de)(de)(de)(de) Corexit 含(han)量(liang)較高(gao)(gao)(gao)(gao),即它們僅 ~6.3 倍(bei)稀(xi)釋的(de)(de)(de)(de) CEWAF,而 DCEWAF 處(chu)理(li)(li)來自 用微生物(wu)濃(nong)(nong)縮物(wu)修(xiu)正(zheng)的(de)(de)(de)(de)沿(yan)海(hai)(hai)水域約(yue) 15 倍(bei) 稀(xi)釋的(de)(de)(de)(de) CEWAF 和(he)經(jing)過修(xiu)正(zheng)的(de)(de)(de)(de)營養物(wu)質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)沿(yan)海(hai)(hai)水域是(shi) ~ 10 倍(bei)稀(xi)釋的(de)(de)(de)(de) DCEWAF(表(biao) 1)。 因此,趨勢線的(de)(de)(de)(de)斜(xie)率 可能(neng)受到 DCEWAF 中 Corexit 數量(liang)的(de)(de)(de)(de)影響,并且 CEWAF 處(chu)理(li)(li) SFT 和(he)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi):多(duo)(duo)糖(tang)(tang) 比(bi)(bi)率。 由(you)于(yu)其(qi)表(biao)面活性劑特(te)性,Corexit 降低了 SFT,但它 還增強了蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)產生,導(dao)致比(bi)(bi)對照(zhao)(zhao)和(he) WAF 處(chu)理(li)(li)更高(gao)(gao)(gao)(gao)的(de)(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi):多(duo)(duo)糖(tang)(tang)比(bi)(bi)率。 這(zhe) 相對 SFT 和(he)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi):對照(zhao)(zhao)和(he) WAF 的(de)(de)(de)(de)多(duo)(duo)糖(tang)(tang)位(wei)置 可能(neng)是(shi)由(you)膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)(ti)和(he)海(hai)(hai)水的(de)(de)(de)(de)組成和(he)濃(nong)(nong)度(du)的(de)(de)(de)(de)微小差異產生的(de)(de)(de)(de)。


為了測試我們的(de)初始 SFT 測量的(de)可(ke)靠性 每(mei)個中宇宙的(de)源水,SFT 的(de)關系由 沙卡維(wei)等人(ren)。 (2010) 可(ke)以使用:



其中(zhong)σsw為海(hai)水(shui)(shui)(shui)的(de)(de)(de)SFT,σw為純(chun)水(shui)(shui)(shui)的(de)(de)(de)SFT,t為 溫度(°C),S 是鹽(yan)度(g/kg),源的(de)(de)(de) SFT 以下中(zhong)宇(yu)宙的(de)(de)(de)水(shui)(shui)(shui)域計算(suan)(suan)為每(mei)個為 73.35 mN/m 中(zhong)宇(yu)宙基于表 1 中(zhong)給出的(de)(de)(de)鹽(yan)度,溫度為 22.8 °C,純(chun)水(shui)(shui)(shui) SFT 為 72.6 mN/m。 采取 我們給出的(de)(de)(de)線性關系(xi)的(de)(de)(de) y 截距(ju)值(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)平(ping)均(jun)值(zhi)(zhi) 圖 1 中(zhong)的(de)(de)(de)每(mei)個中(zhong)胚層,初始值(zhi)(zhi)都(dou)在 < 2% RSD 內(nei) 來自計算(suan)(suan)的(de)(de)(de) 73.35 mN/m 值(zhi)(zhi)。 然而,這個計算(suan)(suan)值(zhi)(zhi) 用(yong)于不含EPS膠體(ti)的(de)(de)(de)海(hai)水(shui)(shui)(shui),它甚至可(ke)以改變SFT 低濃度時,以及 WAF 和 西瓦夫。


從圖 1 中(zhong)可(ke)以(yi)明顯看出,在(zai) EPS 膠體(ti)部分中(zhong), 蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi):多(duo)(duo)(duo)糖(tang)比率與海水中(zhong)的(de)(de)(de) SFT 相(xiang)(xiang)(xiang)關。 這(zhe)個(ge) pH ~ 8 高于大多(duo)(duo)(duo)數蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de) pI(pI 是(shi)等電點, 這(zhe)是(shi)分子(zi)上的(de)(de)(de)凈電荷(he)為零(ling)時(shi)的(de)(de)(de) pH 值)。 在(zai) 在(zai)海水 pH 值下,氨基(ji)(ji)酸的(de)(de)(de)羧(suo)酸位(wei)點處于解(jie)離(li)形(xing)式(shi),氨基(ji)(ji)帶正電荷(he)為 R-NH3+。 因此,蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)與酸性(xing)(xing)(xing)(xing)多(duo)(duo)(duo)糖(tang)之間的(de)(de)(de)相(xiang)(xiang)(xiang)互(hu)作(zuo)(zuo)用 由陰離(li)子(zi)反應位(wei)點之間的(de)(de)(de)相(xiang)(xiang)(xiang)互(hu)作(zuo)(zuo)用控(kong)制 多(duo)(duo)(duo)糖(tang)和(he)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)小陽離(li)子(zi)反應位(wei)點, 導致形(xing)成可(ke)溶性(xing)(xing)(xing)(xing)陰離(li)子(zi)"蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)-多(duo)(duo)(duo)糖(tang)"聚(ju)集(ji)體(ti)(Ghosh 和(he) Bandyopadhyay 2012)。 這(zhe)些多(duo)(duo)(duo)糖(tang)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)復合(he)物表(biao)現出廣泛的(de)(de)(de)特(te)(te)性(xing)(xing)(xing)(xing),包括它們的(de)(de)(de) 穩定(ding)空氣-水或油(you)-水界(jie)面(mian)(mian)的(de)(de)(de)能(neng)力(li),以(yi)及增粘和(he) 膠凝特(te)(te)性(xing)(xing)(xing)(xing)(Ghosh 和(he) Bandyopadhyay 2012)。 的(de)(de)(de)穩定(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing) 當通過(guo)以(yi)下方法穩定(ding)時(shi),油(you)乳(ru)(ru)液(ye)液(ye)滴(di)預計會更高 與其他表(biao)面(mian)(mian)活性(xing)(xing)(xing)(xing)劑相(xiang)(xiang)(xiang)比,蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)-多(duo)(duo)(duo)糖(tang)復合(he)物 分子(zi)或顆(ke)粒,或多(duo)(duo)(duo)糖(tang)或單獨的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(Tcholakova 等。 2008)。 此外,蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)傾向于通過(guo)在(zai)液(ye)滴(di)周圍提供更厚的(de)(de)(de)層和(he)更大的(de)(de)(de)表(biao)面(mian)(mian)覆蓋來穩定(ding)乳(ru)(ru)液(ye) 界(jie)面(mian)(mian)面(mian)(mian)積,從而減少奧斯特(te)(te)瓦爾德(de)熟化過(guo)程(即, 小尺寸油(you)滴(di)的(de)(de)(de)消失(shi)以(yi)更大尺寸的(de)(de)(de)油(you)滴(di)為代價(jia) 液(ye)滴(di)形(xing)成)在(zai)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)穩定(ding)的(de)(de)(de)乳(ru)(ru)液(ye)中(zhong)。



圖 2. 使用(yong)沿海水域(yu)的(de)中(zhong)宇宙(zhou)實(shi)驗中(zhong)的(de)尺(chi)寸(cun)(cun)分(fen)(fen)(fen)數數據 用(yong)微生物(wu)濃(nong)縮物(wu)修(xiu)正(zheng)。 上面(mian)板顯示(shi)了(le) SFT 沿海中(zhong)觀處理,按(an)大小分(fen)(fen)(fen)數分(fen)(fen)(fen)組,來(lai)自水體 樣品。 a) < 0.45 μm,其中(zhong)顆(ke)粒已被過濾掉(diao),b) EPS 膠(jiao)體部分(fen)(fen)(fen)(< 0.45 μm 和(he)(he) > 3 kDa,8.3x 濃(nong)縮),和(he)(he) c) < 3 kDa 的(de)"真正(zheng)溶解(jie)(jie)"部分(fen)(fen)(fen)。 下面(mian)板表示(shi)有(you)機(ji) 相(xiang)同(tong)尺(chi)寸(cun)(cun)部分(fen)(fen)(fen)的(de)碳,d) DOC,溶解(jie)(jie)的(de)有(you)機(ji)碳,e) 膠(jiao)體有(you)機(ji)碳,和(he)(he) f) 真正(zheng)溶解(jie)(jie)。


 雖(sui)然我(wo)們的(de)討(tao)論集中在(zai)蛋白(bai)質和(he)(he)多糖(tang)(tang)的(de)非共(gong)價相互(hu)作(zuo)用上,但蛋白(bai)質和(he)(he)多糖(tang)(tang)之(zhi)間的(de)共(gong)價鍵(jian) 當天然狀態作(zuo)為蛋白(bai)聚糖(tang)(tang)存(cun)(cun)在(zai)時,多糖(tang)(tang)存(cun)(cun)在(zai) 或糖(tang)(tang)蛋白(bai)。 此(ci)外,共(gong)價交(jiao)聯可以通過(guo) UVB 和(he)(he) ROS 效(xiao)應(Sun 等(deng)人,2017 年(nian))。 之(zhi)間的(de)共(gong)價鍵(jian) 蛋白(bai)質中谷氨酰胺的(de)羧基(ji)和(he)(he)賴氨酸的(de)氨基(ji) 也(ye)可以通過(guo)微生物釋放轉谷氨酰胺酶(mei)形成分(fen)子(McClements 2011)。 所有共(gong)價鍵(jian)合過(guo)程(cheng)都會 促進 EPS-Corexit-油-水乳(ru)液的(de)穩定性。


3.2. 中觀實驗中尺寸分數的表面張力


不同(tong)尺(chi)寸(cun)的(de)(de)(de)(de)(de) SFT(圖 2a、b、c)和有(you)(you)機碳(2d、2e、2f) 最后(hou)一天水(shui)柱樣(yang)品中(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)餾分和處理 中(zhong)宇(yu)宙(zhou)實驗的(de)(de)(de)(de)(de)結果,使用經過修正的(de)(de)(de)(de)(de)沿海水(shui) 沿海微生物(wu)濃(nong)(nong)縮(suo)物(wu)。 尺(chi)寸(cun)分數是溶(rong)解的(de)(de)(de)(de)(de) (≤0.45 um 部分,沒有(you)(you)操(cao)作定義的(de)(de)(de)(de)(de)顆粒),EPS 膠(jiao)體相(≤0.45 um and ≥ 3 kDa),真正溶(rong)解的(de)(de)(de)(de)(de) (≤3 kDa) 不含 EPS 膠(jiao)體。 頂(ding)部面板(ban)顯示 SFT 測(ce)量(liang)值(zhi),下(xia)面的(de)(de)(de)(de)(de)面板(ban)是有(you)(you)機碳濃(nong)(nong)度,和 對應測(ce)量(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)三個(ge)尺(chi)寸(cun)分數對齊(qi) 垂直(zhi)。 所有(you)(you)處理,Control、WAF、CEWAF 和 DCEWAF,都是 代(dai)表。 圖 2a 和 c 所示的(de)(de)(de)(de)(de)樣(yang)品直(zhi)接來自 mesocosm,而圖 2b 的(de)(de)(de)(de)(de)膠(jiao)體部分濃(nong)(nong)縮(suo)了(le) 8.3 次。


SFT(圖 2)結果表明(ming) EPS 膠體(ti)相是(shi)(shi) 導致 SFT 變(bian)化的(de)(de)(de)(de)(de)尺寸分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)數(shu)(shu)(shu)。 這個(ge)觀察 取(qu)自 2c,其(qi)中(zhong)真正溶(rong)解的(de)(de)(de)(de)(de)尺寸分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)數(shu)(shu)(shu)是(shi)(shi)一致的(de)(de)(de)(de)(de) ~73.2 mN/m at 所(suo)有處理。 此外,變(bian)化較小 溶(rong)解部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)是(shi)(shi) EPS 膠體(ti)部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)與 真正解散了。 單向(xiang)方(fang)差分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)析用(yong)于評估潛力(li) 圖 2a 和(he)(he)(he)(he) b 中(zhong)處理之(zhi)間(jian)(jian)的(de)(de)(de)(de)(de)差異,溶(rong)解和(he)(he)(he)(he) EPS 膠體(ti)部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)之(zhi)間(jian)(jian)的(de)(de)(de)(de)(de)差異。 方(fang)差分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)析在 alpha 下運行(xing) 0.05 的(de)(de)(de)(de)(de)水平。 對(dui)照(zhao) SFT 值顯示(shi)無顯著(zhu)差異 (p = 0.26) 在圖 2a 的(de)(de)(de)(de)(de)溶(rong)解 (< 0.45 μm) 部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)和(he)(he)(he)(he)圖 2b 的(de)(de)(de)(de)(de) EPS 膠體(ti)部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)之(zhi)間(jian)(jian)。 然而,有一個(ge)顯著(zhu)的(de)(de)(de)(de)(de) 圖 2a 和(he)(he)(he)(he) b 中(zhong)相同(tong)尺寸分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)數(shu)(shu)(shu)之(zhi)間(jian)(jian)的(de)(de)(de)(de)(de)差異 其(qi)他(ta)處理,如 WAF、CEWAF 和(he)(he)(he)(he) DCEWAF,分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)別(bie)為 0.002、0.006 和(he)(he)(he)(he) 0.016。 這些 結果是(shi)(shi)值得注(zhu)意的(de)(de)(de)(de)(de),因為它們(men)表明(ming)濃縮的(de)(de)(de)(de)(de) EPS 膠體(ti)影響了控制中(zhong)水的(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)子間(jian)(jian)作用(yong)力(li) 在 SFT 中(zhong)與未(wei)集中(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)那些沒有太大(da)區(qu)別(bie) 無顆粒的(de)(de)(de)(de)(de)溶(rong)液。 然而,其(qi)他(ta)治療方(fang)法(fa) WAF, CEWAF 和(he)(he)(he)(he) DCEWAF 之(zhi)間(jian)(jian)具有更強的(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)子間(jian)(jian)作用(yong)力(li) EPS膠體(ti)部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)表面的(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)子比溶(rong)解部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)的(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)子多(duo)。 這強烈(lie)表明(ming) EPS 膠體(ti)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)數(shu)(shu)(shu) 與溶(rong)解部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)相比,對(dui) SFT 的(de)(de)(de)(de)(de)影響更大(da)。


圖(tu) 2 中的(de)有(you)機碳(tan)(tan)(tan)表(biao)明大部(bu)分(fen)溶解(jie)的(de) 部(bu)分(fen),圖(tu) 2d,由低分(fen)子量碳(tan)(tan)(tan)組成,因為總溶解(jie)部(bu)分(fen),圖(tu) 2f,幾乎(hu)等于 有(you)機碳(tan)(tan)(tan)濃度中的(de)溶解(jie)分(fen)數。 膠(jiao)(jiao)體 餾分(fen)(圖(tu) 2e)表(biao)明超濾已去除了 85% 到 95% 的(de) 溶解(jie)部(bu)分(fen)的(de)有(you)機碳(tan)(tan)(tan)。 這(zhe)可能(neng)表(biao)明 5% 到 15% 的(de) CEWAF 可能(neng)保(bao)留(liu)在 EPS 膠(jiao)(jiao)體部(bu)分(fen)中, 表(biao)明 SFT 的(de)降(jiang)(jiang)低(圖(tu) 2b)也受 Corexit 的(de)影響(xiang) 和(he) WAF。 然而,使(shi)(shi)用 SFT 與(yu) Corexit 濃度數據(ju), 圖(tu) 4b,即使(shi)(shi)是 15% 的(de) Corexit 也無法解(jie)釋 在圖(tu) 1 的(de) CEWAF 處理中測量的(de) SFT 降(jiang)(jiang)低。


3.3. 使用顯微鏡觀察界面(mian)(空氣(qi)/水(shui))相互作用 模型分(fen)子的混合物顯示在空氣(qi)-水(shui)中富集的蛋(dan)白質 界面(mian)


四種治(zhi)療的(de)(de)共聚(ju)焦激(ji)光(guang)掃(sao)描(miao)顯(xian)(xian)微鏡 (CLSM) 帶有(you)模(mo)(mo)型 EPS 組(zu)件的(de)(de)處理(li)(li)如圖(tu) 3 所示(shi)。 ASW 顯(xian)(xian)示(shi)在(zai)(zai)左側(ce) BSA 的(de)(de) 0.1% 垂直系列溶液(ye)中 右邊(bian)是一(yi)系列 0.1% 的(de)(de)海(hai)(hai)(hai)(hai)(hai)藻(zao)(zao)(zao)(zao)酸溶液(ye)。 橫向, 面(mian)板顯(xian)(xian)示(shi)了 Corexit、CEWAF、WAF 的(de)(de)相(xiang)應(ying)處理(li)(li), 和(he)對(dui)照(zhao),用于(yu) BSA 和(he)海(hai)(hai)(hai)(hai)(hai)藻(zao)(zao)(zao)(zao)酸溶液(ye)。 綠色熒光(guang)探針 CTC 突出顯(xian)(xian)示(shi)與(yu)陰離(li)子結(jie)合(he)的(de)(de)親(qin)(qin)水(shui)性 Ca2+ 多糖和(he)蛋白質的(de)(de)區(qu)域。 對(dui)于(yu)海(hai)(hai)(hai)(hai)(hai)藻(zao)(zao)(zao)(zao)酸和(he) BSA實(shi)驗,單獨(du)使用Corexit就可以分散模(mo)(mo)型分子 無界(jie)(jie)面(mian)積(ji)(ji)聚(ju)。 圖(tu)像(xiang)也顯(xian)(xian)示(shi)出明亮密集 微聚(ju)集體(ti)中較高傾向的(de)(de)綠色熒光(guang) Corexit 比(bi)在(zai)(zai)其他治(zhi)療中看到的(de)(de)要(yao)多。 海(hai)(hai)(hai)(hai)(hai)藻(zao)(zao)(zao)(zao)酸面(mian)板全部(bu)顯(xian)(xian)示(shi) 聚(ju)集體(ti)的(de)(de)分散,而(er) BSA 面(mian)板顯(xian)(xian)示(shi)主(zhu)要(yao)在(zai)(zai)界(jie)(jie)面(mian)處的(de)(de)蛋白質。 CEWAF 海(hai)(hai)(hai)(hai)(hai)藻(zao)(zao)(zao)(zao)酸和(he) BSA 可以生成 清(qing)晰的(de)(de)界(jie)(jie)面(mian)層(ceng)(ceng)。 CEWAF 中的(de)(de) BSA 顯(xian)(xian)示(shi)聚(ju)合(he) 當(dang)它們向上(shang)(shang)擴散時在(zai)(zai)垂直方向上(shang)(shang)被夸大 隨著圖(tu)像(xiang)曝光(guang)的(de)(de)時間(jian)。 此外(wai),BSA CEWAF 顯(xian)(xian)示(shi)聚(ju)集體(ti)似(si)乎在(zai)(zai)液(ye)體(ti)表面(mian)上(shang)(shang)方,因為它們是 在(zai)(zai)未顯(xian)(xian)示(shi)的(de)(de)泡沫(mo)層(ceng)(ceng)之內(nei)和(he)之上(shang)(shang)。 具有(you)主(zhu)要(yao)親(qin)(qin)水(shui)部(bu)分的(de)(de)控制(zhi)處理(li)(li)表現(xian)出較少的(de)(de)分散 和(he)不太(tai)明顯(xian)(xian)的(de)(de)界(jie)(jie)面(mian)層(ceng)(ceng)。 雖然垂直尺度較小 對(dui)于(yu) BSA 圖(tu)像(xiang)比(bi)對(dui)于(yu)海(hai)(hai)(hai)(hai)(hai)藻(zao)(zao)(zao)(zao)酸圖(tu)像(xiang),仍然很明顯(xian)(xian) 海(hai)(hai)(hai)(hai)(hai)藻(zao)(zao)(zao)(zao)酸分散在(zai)(zai)整個體(ti)積(ji)(ji)中,而(er) BSA 迅速擴散到界(jie)(jie)面(mian)。 唯一(yi)的(de)(de)例(li)外(wai)是 Corexit 處理(li)(li)顯(xian)(xian)示(shi)沒有(you)界(jie)(jie)面(mian)積(ji)(ji)聚(ju)和(he)完全分散 海(hai)(hai)(hai)(hai)(hai)藻(zao)(zao)(zao)(zao)酸和(he)BSA。


相同放大(da)倍數下 BSA 聚(ju)(ju)集(ji)體(ti)的(de)(de)(de) SEM 圖(tu)像(圖(tu) 3b) 在 Corexit(左)和(he) ASW 中用 0.1% BSA 溶液(ye)制備 來(lai)(lai)自(zi)與圖(tu) 3a 中相同的(de)(de)(de)溶液(ye)的(de)(de)(de)對照(zhao)處(chu)(chu)理(右(you))。 這 Corexit 處(chu)(chu)理(左圖(tu) 3b)顯(xian)示來(lai)(lai)自(zi)液(ye)體(ti)的(de)(de)(de)微聚(ju)(ju)集(ji)體(ti) 階段(duan)。 對照(zhao)處(chu)(chu)理(圖(tu) 3b 右(you))顯(xian)示了一(yi)個大(da)結晶 蛋(dan)白質聚(ju)(ju)集(ji)體(ti)。 圖(tu) 3a 和(he) 3b 中描繪的(de)(de)(de)結果支持 靜(jing)電相互作用和(he)共(gong)價鍵(jian)作用的(de)(de)(de)重要性 在微聚(ju)(ju)集(ji)體(ti)形(xing)成(cheng)中(Corexit 與 Ca2+ 離(li)子(zi)突出顯(xian)示 CTC) 和(he) Ca2+ 螯合中的(de)(de)(de)配位共(gong)價鍵(jian) CTC 和(he)陰離(li)子(zi)親水部分(fen)(CEWAF、WAF 和(he)對照(zhao) 處(chu)(chu)理)形(xing)成(cheng)比 Corexit 更(geng)少但更(geng)大(da)的(de)(de)(de)聚(ju)(ju)集(ji)體(ti) 治療。


圖(tu)(tu) 3.a. 使用氯四(si)環(huan)素 (CTC) 熒光探針染(ran)色的 CLSM 圖(tu)(tu)像在(zai)不同(tong)處理中(zhong)的空氣/水(shui)界面關系 多(duo)糖和(he)蛋白質(zhi)的親水(shui)性(xing) Ca2+ 結合陰離子區域。 垂直面板(ban)組在(zai)左(zuo)(zuo)側代表(biao) 0.1% BSA 蛋白和(he) 0.1% 右側的海藻酸 (AA),每(mei)(mei)個都在(zai) ASW 中(zhong)。 水(shui)平面板(ban)組比(bi)較了不同(tong)處理中(zhong)的 BSA 和(he) AA 溶液。 比(bi)例(li)尺表(biao)示(shi) 每(mei)(mei)個方向(xiang) 100 μm。 灣(wan) BSA 的 SEM 圖(tu)(tu)像 在(zai)相(xiang)同(tong)放大(da)倍數下聚集顯(xian)示(shi) 比(bi)例(li)尺為 3 μm。 總(zong)量來(lai)自(zi)(zi) 0.1% Corexit 中(zhong) ASW 中(zhong)的 BSA 解(jie)決(jue)方案,左(zuo)(zuo)側和(he) BSA 中(zhong) 控制治療,對(dui)。 兩幅 SEM 圖(tu)(tu)像均來(lai)自(zi)(zi) 相(xiang)應的解(jie)決(jue)方案如圖(tu)(tu) 3 所示(shi)。 Corexit 處理顯(xian)示(shi)分散的微聚集體 來(lai)自(zi)(zi)水(shui)相(xiang)。 控制處理 顯(xian)示(shi)大(da)的結晶蛋白質(zhi)聚集體。



圖 4.a) 顯(xian)示了海水中模型蛋(dan)白質的(de) SFT 作為(wei)(wei)其(qi)濃度自然對數的(de)函數。 BSA 蛋(dan)白的(de) CMC 為(wei)(wei) 6–8 mg/L。 b) 顯(xian)示 Corexit 的(de) CMC 濃度為(wei)(wei) 22 mg/L。


表 2 SFT 和 CMC 比較模(mo)型蛋白(bai)質(zhi)(zhi)和酸性(xing)多糖。 雖然Corexit 更有(you)效地降低(di) SFT,EPS 模(mo)型成分更有(you)效 因為需(xu)要低(di)得(de)多的濃(nong)度(du)才能開始乳化(蛋白(bai)質(zhi)(zhi))和 穩定(ding)成分(酸性(xing)多糖;結(jie)合大分子(zi)并添加(jia) 粘度(du))。



3.4. 臨界膠束濃度的表面張力測量 模型生物分子


EPS 包括各種蛋白質和(he)(he)酸性(xing)(xing)(xing)多(duo)糖(tang),因(yin)此(ci) SFT 可以 用(yong)于對模型蛋白和(he)(he)多(duo)糖(tang)進行 CMC 測試。 在(zai) 圖(tu)(tu) 4a,BSA 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de) CMC,一種分(fen)子(zi)量為 66 kDa 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)小而(er)穩定的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)中等非反應性(xing)(xing)(xing)蛋白質,因(yin)其缺乏作用(yong)而(er)經常使用(yong) 在(zai)許多(duo)生(sheng)化(hua)反應中)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de) CMC 為 6–8 mg/L,SFT 為 68 毫牛/米。 圖(tu)(tu) 4b 顯示了廣泛使用(yong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)散(san)劑 Corexit 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de) CMC 在(zai)深水地平線馬孔多(duo)漏油事件中。 表(biao)(biao) 2 比較 模型分(fen)子(zi)和(he)(he) Corexit 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)有(you)效(xiao)性(xing)(xing)(xing)和(he)(he)效(xiao)率(lv)(lv) 降(jiang)低(di)表(biao)(biao)面(mian)張(zhang)力。 就表(biao)(biao)面(mian)活性(xing)(xing)(xing)分(fen)子(zi)而(er)言,效(xiao)率(lv)(lv)隨著形成(cheng)(cheng)表(biao)(biao)面(mian)活性(xing)(xing)(xing)劑所需的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)表(biao)(biao)面(mian)活性(xing)(xing)(xing)劑濃度而(er)增(zeng)加 CMC是最(zui)低(di)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)。 然而(er),表(biao)(biao)面(mian)活性(xing)(xing)(xing)劑的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)有(you)效(xiao)性(xing)(xing)(xing) 當它(ta)在(zai)更大(da)程度上降(jiang)低(di)表(biao)(biao)面(mian)張(zhang)力時更高(gao)。 這 商業分(fen)散(san)劑 Corexit 更有(you)效(xiao)但效(xiao)率(lv)(lv)較低(di) 比 EPS 成(cheng)(cheng)分(fen)降(jiang)低(di) SFT(表(biao)(biao) 2)。 所以,Corexit 有(you)效(xiao) 當它(ta)位于 CMC 時,將(jiang) SFT 降(jiang)低(di)到大(da)約 42–32 mN/m。 蛋白質 BSA 和(he)(he)酸性(xing)(xing)(xing)多(duo)糖(tang)(帶有(you)羧基部分(fen)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)葡(pu)萄糖(tang)醛酸; 帶有(you)硫(liu)酸根的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)角叉菜膠是 EPS 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)兩種典(dian)型成(cheng)(cheng)分(fen)), 在(zai)促進膠束的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)兩親(qin)分(fen)子(zi)自組(zu)(zu)裝方面(mian)非常有(you)效(xiao)。 雖然模型組(zu)(zu)件并沒(mei)有(you)降(jiang)低(di)表(biao)(biao)面(mian)張(zhang)力 作為 Corexit,它(ta)們在(zai)形成(cheng)(cheng)小于 2 倍的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)膠束時更有(you)效(xiao) Corexit 達到 CMC 所需的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)濃度。


3.5. pH變化對模型生物分子表面張力的影響


葡萄(tao)(tao)糖醛酸(suan),一種酸(suan)性多糖,在(zai)(zai)低(di)(di)(di)濃度下(xia)降(jiang)低(di)(di)(di) SFT 濃度,符(fu)合(he)預期(qi)。 然而,BSA 蛋白會(hui)導致(zhi)增(zeng)加(jia) 在(zai)(zai)低(di)(di)(di)濃度的(de)(de) SFT 中(zhong)(圖 5)。 據我們所知,文獻中(zhong)尚未記錄生(sheng)物聚合(he)物的(de)(de)這(zhe)種效(xiao)應。 在(zai)(zai)這(zhe)種情況下(xia) BSA,低(di)(di)(di)濃度乳(ru)化劑(ji)(ji)(ji)或表面(mian)活(huo)性劑(ji)(ji)(ji),標準免(mian)費 氣(qi)水(shui)(shui)界面(mian)的(de)(de)能量(liang)(liang)經(jing)歷熵的(de)(de)增(zeng)加(jia),因(yin)為(wei) 分子(zi)的(de)(de)疏(shu)水(shui)(shui)部(bu)分從水(shui)(shui)性 相到空氣(qi)。 在(zai)(zai)重新定向疏(shu)水(shui)(shui)性尾部(bu)的(de)(de)過程中(zhong) 分子(zi)進入空氣(qi),有序的(de)(de)水(shui)(shui)分子(zi)的(de)(de)殼 尾部(bu)周(zhou)圍(wei)被噴射到大量(liang)(liang)水(shui)(shui)相中(zhong)。 隨(sui)著(zhu)不利的(de)(de)熵增(zeng)加(jia),SFT 增(zeng)加(jia)。 然后隨(sui)著(zhu) 乳(ru)化劑(ji)(ji)(ji)/表面(mian)活(huo)性劑(ji)(ji)(ji)分子(zi)在(zai)(zai)表面(mian)的(de)(de)濃度, 較高的(de)(de)熵消散并且表面(mian)張(zhang)力降(jiang)低(di)(di)(di)(Angarska 等(deng)。 2004; Warszynski 等(deng)人。 1998年; Wang 和(he) Yoon 2004)。 這(zhe)種效(xiao)果 當生(sheng)物聚合(he)物的(de)(de)含量(liang)(liang)低(di)(di)(di)到可以忽(hu)略不計時 疏(shu)水(shui)(shui)性,如(ru)葡萄(tao)(tao)糖醛酸(suan)的(de)(de)情況。



圖(tu)(tu) 5.a) 葡糖(tang)(tang)醛酸(suan),一種酸(suan)性(xing)多糖(tang)(tang),證明在低濃度下(xia)(xia) SFT 降(jiang)低。 b) 相反,BSA 蛋白在低 專注。 然而(er),BSA 在較高濃度下(xia)(xia)再次降(jiang)低。 低濃度下(xia)(xia) SFT 的這種增加可(ke)以(yi)通過水中 pH 值的降(jiang)低來(lai)解釋(shi) 由(you) BSA 引起,圖(tu)(tu) 6。



圖(tu) 6. 改變(bian) BSA 蛋(dan)白的溶(rong)液中(zhong)糖醛(quan)(quan)酸(葡(pu)萄糖醛(quan)(quan)酸)濃(nong)(nong)度(du)為(wei) 3 mg/L 時的 SFT(菱(ling)形)和 pH(空心(xin)方塊(kuai)) 濃(nong)(nong)度(du)。 CMC,臨界膠束濃(nong)(nong)度(du),在 BSA 濃(nong)(nong)度(du)為(wei) 10 mg/L + 3 mg/L 葡(pu)萄糖醛(quan)(quan)酸。 pH 值(zhi)變(bian)化約 0.3 個單位 SFT 范圍為(wei) 7 mN/m。 


盡管有海(hai)水的(de)緩沖能力,但圖 6 中的(de)數據顯示 由 < 1 pH 的(de)生物分(fen)子的(de)酸度(du)(du)引起的(de) pH 變(bian)化(hua) 單位與 SFT 的(de)變(bian)化(hua)呈(cheng)負相關。 這表(biao)明即使 pH 值的(de)微(wei)小變(bian)化(hua)可能是膠束形成的(de)重要因素 (CMC 濃度(du)(du),~10 mg/L BSA + 3 mg/L 葡萄糖醛酸,圖 6)。 此外,在較(jiao)(jiao)低的(de) pH 值下,有較(jiao)(jiao)高濃度(du)(du)的(de)游離 氫離子導致氫鍵的(de)電位增加(jia)。


這些結果的(de)(de)重要性(xing)在(zai)于(yu),即使在(zai)小(xiao)范圍內(nei), pH 值(zhi)的(de)(de)變化(hua)可(ke)(ke)能會(hui)(hui)影響(xiang)分(fen)子間的(de)(de)電荷關系(xi)和 誘導分(fen)子自組裝。 欽等人(ren)。 1998年指出鈣(gai) 由(you)于(yu)唐南效應(ying),內(nei)部凝(ning)膠可(ke)(ke)能會(hui)(hui)過飽(bao)和,例如(ru) pH 值(zhi)的(de)(de)輕微(wei)增(zeng)加不會(hui)(hui)導致結晶 海水會(hui)(hui)導致凝(ning)膠內(nei)沉淀(dian),特別是(shi)在(zai) 具有(you)高(gao)生產力的(de)(de)微(wei)環境。



蛋白質外聚物中多糖的比例——摘要、簡介

蛋白質外聚物中多糖的比例——方法

蛋白質外聚物中多糖的比例——結果與討論

蛋白質外聚物中多糖的比例——結論、致謝!